بهینه سازی شرایط رشد باکتری ترموفیل ایرانی geobacillus sp.mkk مولد آنزیم dna پلیمراز به منظور تعیین ویژگی های آنزیم برای کاربرد در تکنیک pcr
پایان نامه
- وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه الزهراء - دانشکده علوم پایه
- نویسنده محدثه حاجی عبدالوهاب
- استاد راهنما جمشید فولادی سارا غروی
- سال انتشار 1388
چکیده
dnaپلیمرازها، آنزیم های مسئول حفظ، همانندسازی و انتقال اطلاعات ژنتیکی در تمام ارگانیسم ها می باشند. هم یوکاریوت ها و هم پروکاریوت ها چندین آنزیم dna پلیمراز مختلف دارند که بعضی از آنها در همانندسازی ژنوم، بعضی در ترمیم و بعضی دیگر در فرایندهای جانبی مختلف دخالت دارند. بیشتر بیولوژیdna پلیمراز ها از مطالعات گوناگون بر روی اولین dna پلیمراز شناخته شده- dna پلیمراز і باکتری e. coli- بدست آمده است. با شناسایی اولین آنزیم dna پلیمراز مقاوم به حرارت- taq dna polymerase- و کاربرد آن در تکنیک pcr، تحقیقات بیولوژی مولکولی جهش چشمگیری پیدا کرد و اهمیت مطالعه و شناسایی dna پلیمرازهای مقاوم به حرارت مختلف را دو چندان ساخت. در پژوهش حاضر باکتری ترموفیل بومی ایران به نام geobacillus sp.mkk مشابه باکتری geobacillus stearothermophilus با توانایی تولید dna پلیمراز مقاوم به حرارت ، مورد مطالعه قرار گرفته و شرایط رشد آن به منظور بدست آوردن بیشترین تعداد باکتری و در نتیجه بالاترین مقدار آنزیم dna پلیمراز، بهینه گردید. با استفاده از اسپکتروفتومتر تعداد سلول های باکتری در طول موج 600 نانومتر در شرایط مختلف بررسی و مقایسه شد و بهترین شرایط برای رشد باکتری بدست آمد. در میان منبع های مختلف کربن (گلوکز، گالاکتوز، فروکتوز، لاکتوز و آب پنیر) گلوکز به عنوان بهترین منبع کربن، در میان منبع های مختلف ازت (عصاره مخمر، آمونیوم سولفات، اوره) عصاره مخمر بهترین منبع ازت، در بین دماهای مختلف (40،45،50،55،60،65) دمای 55 درجه سانتیگراد مناسب ترین دما، در میان ph های مختلف (4 ،5 ،6 ،7 ،8) 6ph از همه بهتر و بین rpm های مختلف (120، 150، 170، 200) rpm150 از همه مناسب تر بود. سپس در شرایط بهینه منحنی رشد باکتری رسم گردید و باکتری ها در اواخر فاز لگاریتمی که دارای بیشترین تعداد و فعالیت می باشند، برای بدست آوردن عصاره سلولی مورد استفاده قرار گرفتند. از عصاره سلولی بدست آمده در واکنش pcr به جای taqپلیمراز استفاده شد و نتایج نشان داد که آنزیم dna پلیمراز موجود در عصاره سلولی توانایی انجام واکنش pcr را دارد.
منابع مشابه
بهینه سازی شرایط کشت به منظور تولید آنزیم فیتاز توسط باکتری باسیلوس سوبتیلیس جدا شده از خاک
سابقه و هدف: فیتات منبع مهم فسفات در دانههای گیاهی می باشد. فیتات اثرات ضد تغذیهای قوی در انسان و حیوانات (دام، طیور، ماهیها) دارد. آنزیم فیتاز یک زیرگروه از فسفاتازها میباشد که هیدرولیز فیتات را کاتالیز میکند. فیتاز میکروبی، پتانسیل کاربرد بیوتکنولوژیکی در زمینههای مختلف مانند کشاورزی، تغذیه انسان و حیوانات دارد. این مطالعه با هدف بهینه سازی شرایط تولید فیتاز توسط باک...
متن کاملبهینه سازی شرایط کشت به منظور تولید آنزیم فیتاز توسط باکتری باسیلوس سوبتیلیس جدا شده از خاک
سابقه و هدف: فیتات منبع مهم فسفات در دانههای گیاهی می باشد. فیتات اثرات ضد تغذیهای قوی در انسان و حیوانات (دام، طیور، ماهیها) دارد. آنزیم فیتاز یک زیرگروه از فسفاتازها میباشد که هیدرولیز فیتات را کاتالیز میکند. فیتاز میکروبی، پتانسیل کاربرد بیوتکنولوژیکی در زمینههای مختلف مانند کشاورزی، تغذیه انسان و حیوانات دارد. این مطالعه با هدف بهینه سازی شرایط تولید فیتاز توسط باک...
متن کاملتعیین فاکتورهی بهینه در رشد مخمر kluyveromyces fragilis به منظور تولید آنزیم بتا-گالاکتوزیداز
متن کامل
جداسازی و شناسایی باکتریهای بومی تجزیه کننده سلولز از خاک
مطالعه حاضر جداسازی و شناسایی باکتری¬های ترموفیلیک (°C 60) و مزوفیلیک (°C 37) تجزیه کننده سلولز را از خاک نشان می¬دهد. باکتری¬های ترموفیل و مزوفیل با استفاده از روش رقت¬سازی متوالی پس از غنی¬سازی محیطهای رشد در حضور میکروکریستالین سلولز به عنوان تنها منبع کربن، جداسازی و خالص¬سازی شدند. غربالگری باکتری¬های خالص سازی شده برای شناسایی باکتری¬های تولید کننده آنزیم سلولاز با استفاده از تکنیک زایموگ...
متن کاملغربال گری استرپتومایسس دی استاتیکوس مولد آنزیم پروتئاز قلیایی و بهینه سازی شرایط تولید آن
زمینه و اهداف: پروتئازهای قلیایی در صنایع مختلفی از جمله داروسازی، عکاسی، ابریشم، غذایی، چرم سازی، شوینده و ... کاربرد دارند. اکتینومیست ها باکتری هایی گرم مثبت هستند که آنزیم های مختلفی از جمله پروتئازها را تولید می کنند. هدف از این پژوهش غربال گری اکتینومیست های بومی مولد پروتئاز قلیایی از نمونه های خاک و بهینه سازی شرایط تولید آنزیم پروتئاز قلیایی آن ها می باشد. مواد و روش کار: در این تحقیق ...
متن کاملCloning and Expression of Bst DNA Polymerase I Gene in E. coli BL21
خلاصه DNA پلیمرازها علاوه بر کاربردشان در همسانه سازی و تصحیح ، در انواع تکنیک های ملکولی مانند تکثیر DNA ، جهش های نقطه ای ، توالی یابی DNA ، انواع مختلف PCR ، LAMP و ...اهمیت دارند. پس از کشف PCR تلاش هایی مبنی بر تشخیص و جداسازی آنزیم های مقاوم به دماهای بالا که توانایی تکثیر موثر DNA در دماهای بالا انجام گرفت. در این پژوهش ، سویه Geobacillus stearothermophilus strain 10 به منظور...
متن کاملمنابع من
با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید
ذخیره در منابع من قبلا به منابع من ذحیره شده{@ msg_add @}
نوع سند: پایان نامه
وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه الزهراء - دانشکده علوم پایه
میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com
copyright © 2015-2023